Beoordeling van door gouden nanodeeltjes geremde cytochroom P450 3A4-activiteit en moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de cellulaire toxiciteit ervan in humane hepatocellulaire carcinoomcellijn C3A

Resultaten en discussie

Fysicochemische karakterisering van kale en menselijke plasma-pc AuNP

De effecten van NP-grootte, oppervlaktelading en PC-vorming in menselijk plasma rond AuNP op de hydrodynamische diameter (D_H ), polydispersiteitsindex (PDI), z-potentiaal en een spectrale eigenschap, evenals de morfologie, zijn gekarakteriseerd met behulp van DLS-, TEM- en UV-Vis-spectroscopie (Fig. 1). In TEM-afbeeldingen was alle kale (geen pc) AuNP in DI-water monodispers met de strakke grootteverdeling en unieke UV-Vis-spectrumbereiken van 521-553 nm (figuur 1a). PC-formaties rond AuNP werden waargenomen met de veranderingen in grootteverdeling en roodverschuivingen van de absorptiespectra (figuur 1b). De D _H en PDI-waarden van de 40 en 80 nm kale en PC AuNP in volledige EMEM waren compatibel tot 24 uur bij 37 °C, behalve voor de 40 en 80 nm PC BPEI-AuNP die een afname in PDI-waarden liet zien (respectievelijk 0,29 en 0,32). ) na 24 uur bij 37 °C vergeleken met die na 0 uur bij 37 °C (respectievelijk 0,62 en 1,0) (tabel 1). Z-potentiaalwaarden van alle kale en PC AuNP daalden relatief na 24 uur bij 37 ° C in vergelijking met die na 0 uur bij 37 ° C. Een aggregatie van de 40 en 80 nm PC BPEI-AuNP in PBS en complete EMEM werd waargenomen, wat correleerde met meerdere pieken in een grootteverdeling en veranderingen in D_H en roodverschuivingen van absorptiespectra ten opzichte van kale BPEI-AuNP (Fig. 1 en aanvullend bestand 1:Figuur S1, Tabel 1). Deze resultaten werden ondersteund door de recente onderzoeken dat de 40 en 80 nm pc en het humaan serumalbumine corona-gecoate BPEI-AuNP werden geaggregeerd in PBS en verschillende celkweekmedia [7,8,9].

Transmissie-elektronenmicrofoto's van a AuNP in gedeïoniseerd water en b PC AuNP in PBS bij 0 uur bij 25 ° C, UV-Vis spectra golflengte (bovenste inzet), en de dynamische lichtverstrooiing distributie (onderste inzet). Pijlen geven pc-vorming aan. PC humaan plasma-eiwit corona, BPEI vertakt polyethyleenimine, LA liponzuur, PEG polyethyleenglycol

AuNP-cytotoxiciteit

AuNP-cytotoxiciteit werd gemeten met behulp van mediane letale concentratie (LC₅₀ ) in C3A-cellen. De NP-oppervlaktelading-, deeltjesgrootte- en PC-vorming rond NP-afhankelijke LC₅₀ analyses met AuNP werden getoond in Fig. 2. Alle 40 nm BPEI-, LA en PEG-AuNP en de 80 nm BPEI-AuNP waren cytotoxisch voor C3A-cellen met de overeenkomstige LC₅₀ varieert van 127,3 tot 205,5 μg/cm ² (Fig. 2a). De 80 nm kale PEG-AuNP vertoonde een levensvatbaarheid van 59% van de cellen bij de hoogste concentratie van 250 μg/cm ² , terwijl de 80 nm LA-AuNP niet cytotoxisch was. PC verminderde AuNP-toxiciteit als functie van grootte en oppervlakteladingmodificatie, behalve de 80 nm BPEI-AuNP die 51% cellevensvatbaarheid vertoonde bij 250 μg/cm ² om 24 uur (Fig. 2b). Recente onderzoeken hebben aangetoond dat de 40 nm kale BPEI-AuNP toxisch was voor primaire humane hepatocyten, HUVEC en humane renale proximale tubulaire cellen (HPTC) (LC₅₀ varieert van 22,4–80,3 μg/cm ² ) [7,8,9]. De PC-gecoate BPEI-AuNP was cytotoxisch voor humane hepatocyten, maar HSA-gecoate AuNP was niet cytotoxisch [7]. Deze resultaten suggereerden dat C3A-cellen resistenter zijn tegen AuNP-toxiciteit dan primaire menselijke cellen vanwege een hoge proliferatiesnelheid en metabolische activiteit van kankercellijn [31].

C3A levensvatbaarheid en LC₅₀ waarden van de 40 en 80 nm a AuNP en b PC AuNP. Gegevens vertegenwoordigen gemiddelde  ± S.D. (n = 3). PC humaan plasma-eiwit corona, ND niet bepaald, BPEI vertakt polyethyleenimine, LA liponzuur, PEG polyethyleenglycol, LC₅₀ mediane dodelijke concentratie

Intracellulaire opname van AuNP

NP-grootte-, oppervlaktelading- en pc-afhankelijke cellulaire opname van alle kale en pc-AuNP werden bepaald op 1,56 μg/cm ² tot 24 uur. ANOVA toonde significante veranderingen met grootte, pc en tijd (p < 0,0001), en interacties (pc × grootte, pc × tijd, grootte × tijd en pc × grootte × tijd) (p < 0,001) voor alle AuNP-opname behalve een onbeduidende interactie (PC × grootte) voor LA- en PEG-AuNP-opname (p = 0.2). Zoals getoond in Fig. 3a-f, werd een lineaire toename in cellulaire opname van de 40 en 80 nm kale en PC AuNP waargenomen naast de 40 nm kale en PC BPEI-AuNP die de hoogste cellulaire opname bereikte na 6 uur en daarna afnam ( Afb. 3a). Na 24 uur bevatte de 40 nm kationische BPEI-AuNP echter de hoogste opname gevolgd door neutrale 40 nm PEG-AuNP en vervolgens anionische 40 nm LA-AuNP, die geassocieerd was met de volgorde van C3A-celcytotoxiciteit van AuNP (Fig. 2a ). Dit resultaat is consistent met de eerdere studies dat kationisch poly (N-(2-aminoethyl)acrylamide)- en BPEI-AuNP de grootste cellulaire opname hadden vergeleken met die van anionisch poly(acrylzuur)- en LA-AuNP en neutraal poly( N-(2,3-dihydroxypropyl)acrylamide- en PEG-AuNP in humane colorectale adenocarcinoom Caco-2-cellen, HPTC en humane hepatocyten [9, 32]. Bovendien verzwakte het NP-PC-complex alle 40 en 80 nm BPEI- en LA-AuNP en de 40 nm PEG-AuNP in C3A-cellen maar versnelde de 80 nm PEG-AuNP-opname (Fig. 3f). Deze resultaten worden ondersteund door de recente onderzoeken dat PC de opname van AuNP in HUVEC, HEK en HPTC remde, ongeacht de grootte en oppervlaktelading [8, 9, 33]. Daarentegen versterkten PC- en HSA-corona's de 40 nm PEG-AuNP-opname in menselijke hepatocyten, maar die laatste induceerde de 80 nm PEG-AuNP-opname in HEK [7, 33] .

Tijdsafhankelijke mobiele opname van de 40 nm a BPEI-AuNP, b LA-AuNP en c PEG-AuNP en de 80 nm d BPEI-AuNP, e LA-AuNP en f PEG-AuNP bij afwezigheid en aanwezigheid van pc in C3A-cellen tot 24 uur. Gegevens vertegenwoordigen gemiddelde  ± S.D. (n = 3). Letters waren significant verschillend volgens Tukey's HSD-test. BPEI vertakt polyethyleenimine, LA liponzuur, PEG polyethyleenglycol, PC humaan plasma-eiwit corona, MSD minimaal significant verschil. *p < 0,05; ** p < 0,005; ***p < 0.0001

Metingen van oxidatieve en nitrosatieve stress

Omdat de 40 nm kale BPEI- en PEG-AuNP de hogere cytotoxiciteit en cellulaire opname in C3A-cellen vertoonden in vergelijking met andere AuNP, werden ze geselecteerd om AuNP-geïnduceerde oxidatieve / nitrosatieve stress te onderzoeken. Beide AuNP moduleerden de ROS/RNS-generatie in C3A-cellen op tijd- en concentratieafhankelijke wijze (p < 0,0001) en door interactie (tijd × concentratie, p < 0,0001). Zoals weergegeven in figuur 4a, nam de ROS/RNS-generatie af bij de hogere concentraties van het 40 nm BPEI-AuNP (62,5 μg/cm ² en 125 μg/cm ² ) na 1 uur bij 37 ° C, maar nam toe tot 24 uur. Daarentegen onderdrukte de 40 nm PEG-AuNP de ROS/RNS-generatie aanzienlijk bij 39,1 μg/cm ² verder met een vouwverandering < 0,5 tot 24 uur (Fig. 4b). Activering van celdood draagt ​​vaak bij aan NP-toxiciteit en in de meeste gevallen is een toename van de ROS/RNS-productie, wat leidt tot oxidatieve stress, verantwoordelijk voor NP-toxiciteit [34]. De oppervlakteladingsafhankelijke ROS / RNS-productie werd waargenomen met de 40 nm kationische BPEI- en neutrale PEG-AuNP. De 40 nm BPEI-AuNP vertoonde een bifasisch patroon van ROS / RNS-generatie (antioxidant na 1 uur en pro-oxidant na 3 uur) bij hoge concentraties, wat geassocieerd was met zijn cytotoxiciteit in C3A-cellen (Fig. 2a). Dit resultaat is consistent met de eerdere onderzoeken dat de 40 en 80 nm BPEI-AuNP en de 20 nm citraat-AuNP-geïnduceerde ROS-generatie was geassocieerd met hun cytotoxiciteit in respectievelijk menselijke hepatocyten en HepG2-cellen, op tijd- en concentratieafhankelijke wijze [7, 35]. AuNP toonde oxidatieve stress-geïnduceerde cytotoxiciteit in humane promyelocytische leukemiecellen, HL-60 met een totale glutathionreductie, ongeacht de grootte [19]. Daarentegen diende de 40 nm PEG-AuNP als een antioxidant, wat suggereert dat oxidatieve/nitrosatieve stress mogelijk geen direct mechanisme is van de 40 nm PEG-AuNP-geïnduceerde cytotoxiciteit in C3A-cellen (Fig. 2b).

Tijd- en concentratieafhankelijke ROS/RNS-productie in C3A-cellen die zijn blootgesteld aan a de 40 nm BPEI-AuNP en b de 40 nm PEG-AuNP tot 24 uur. Gegevens vertegenwoordigen gemiddelde  ± S.D. (n = 3). Letters waren significant verschillend volgens Tukey's HSD-test. BPEI vertakt polyethyleenimine, LA liponzuur, PEG polyethyleenglycol, CTRL controle, MSD een minimaal significant verschil, PCN pyocyanine (ROS-inductor). ** p < 0,005; ***p < 0.0001

CYP3A4-activiteitsmeting

Remmende effecten van de 40 en 80 nm kale en PC AuNP op CYP3A4-activiteit werden gekarakteriseerd. Zoals weergegeven in figuur 5, de 40 nm BPEI-, LA- en PEG-AuNP en de 80 nm BPEI-AuNP bij LC₅₀ waarden remden de katalytische activiteit van CYP3A4 in C3A-cellen met de overeenkomstige activiteit van 20,1 tot 31,4% ten opzichte van de controles, ongeacht de grootte en oppervlaktelading. Niet-toxische concentraties van de 80 nm LA- en PEG-AuNP onderdrukten ook de activiteit (respectievelijk 31,4 en 26,6%). PC verbeterde echter aanzienlijk de 40 en 80 nm AuNP-geïnduceerde CYP3A4-remming naast de 40 en 80 nm PEG-AuNP die 63 en 46% activiteit vertoonde in vergelijking met de controles. Dit komt overeen met in vitro-onderzoeken met humaan leverweefsel en hepatocyten dat anionisch looizuur-AuNP en kationisch 40 en 80 nm BPEI-AuNP de katalytische activiteit van CYP3A4 aanzienlijk remden [7, 25]. Daarentegen kationische PEI-AuNP en neutrale polyvinylpyrrolidon-AuNP-geïnduceerde mRNA-expressie van CYP1A2, CYP2C9 en CYP3A4 in HepG2-cellen en CYP2B en CYP3A in respectievelijk rattenleverplakjes [36, 37]. Recent onderzoek meldt dat de 40 en 80 nm kale en PC BPEI-AuNP de CYP3A4-activiteit in menselijke hepatocyten substantieel onderdrukte via een conformationele verandering in eiwit of het blokkeren van de substraatpocket als een omkeerbare remming [7].

Een remmend effect van AuNP op CYP3A4-activiteit in C3A-cellen die gedurende 24 uur zijn blootgesteld aan de 40 en 80 nm BPEI-, LA- en PEG-AuNP in afwezigheid en aanwezigheid van pc. Waarden vertegenwoordigen gemiddelde  ± S.D. (n = 3). BPEI vertakt polyethyleenimine, LA liponzuur, PEG polyethyleenglycol, PC humaan plasma-eiwit corona

Toxiciteitstrajectgerichte genexpressieprofilering van de 40 nm PEG-AuNP

Van de representatieve genen die 13 verschillende stress- en toxiciteitsroutes omvatten, werden in totaal 212 genen (↓186 en ↑26 genen) differentieel tot expressie gebracht op LC₅₀ waarde van de 40 nm PEG-AuNP (afb. 6, aanvullend bestand 1:tabellen S2-S7). De 12,3% (26 genen, ↓26, ↑0 genen) van de totale genen (212 genen) waren voornamelijk betrokken bij mitochondriale vetzuur β-oxidatie; voor apoptose 11,3% (24 genen, A18, A6 genen); voor DNA-beschadiging en herstelroute 11,3% (24 genen, ↓18, ↑6-genen); en voor hitteschokrespons 11,3% (24 genen, ↓22, ↑2).

Representatieve genen betrokken bij a mitochondriaal vetzuur β-oxidatie, b apoptose, c oxidatieve stress en antioxidantreacties, en d leveropname en effluxtransporters bij LC₅₀ waarde van 40 nm PEG-AuNP. Alle gegevens hadden een vouwverandering <− 2 en> 2 bij p < 0.05. Genontologie-analyse wordt vermeld in Aanvullend bestand 1:Tabellen S2-S7

In de mitochondriale vetzuur-β-oxidatieroute, genen die coderen voor drie verschillende enzymen die betrokken zijn bij de productie van acyl-CoA en het verminderen van equivalenten van NADH en FADH₂ werden voornamelijk onderdrukt; ACAD11-, ACAD9-, ACADM- en ACADS-genen in Acyl-CoA-dehydrogenasen (2,0 tot 13,6-voudig); ACAA1 en ACAA2 in ketoacyl-CoA-thiolasen (7,3- tot 14,9-voudig); DECR1, ECHS1, EHHADH en HADHA (10,7- tot 18,9-voudig) in enoyl-CoA-hydratase (figuur 6a, aanvullend bestand 1:tabel S2). Mitochondriale vetzuur-β-oxidatie speelt een belangrijke rol bij de productie van acyl-CoA en het verminderen van equivalenten van NADH en FADH₂ , dat is geassocieerd met vier hoofdenzymen (acyl-CoA-dehydrogenasen, enoyl-CoA-hydratasen, hydroxyacyl-CoA-dehydrogenasen en ketoacyl-CoA-thiolasen [38, 39]. Verder elektronendragers, NADH en FADH₂ , zijn betrokken bij de tricarbonzuur (TCA) -cyclus en de mitochondriale ademhalingsketen, wat resulteert in ATP-productie. In de huidige studie induceerde de 40 nm PEG mitochondriale disfunctie, een verlies van ATP-onderhoud via een afname van de intracellulaire niveaus van ATP en FADH₂ , waardoor de cytotoxiciteit ervan in C3-cellen wordt gedefinieerd (figuur 2a). Het vergelijkbare fenomeen werd gerapporteerd in menselijke hepatocyten, HUVEC en HPTC, blootgesteld aan het 40 nm BPEI-AuNP, wat aangeeft dat mitochondriale disfunctie een algemeen mechanisme van AuNP-toxiciteit kan zijn, ongeacht de oppervlaktelading en celtypes [7,8,9]. Een recente studie heeft gemeld dat mitochondriale disfunctie-relevante cytotoxiciteit werd waargenomen in onsterfelijk gemaakte prostaatkankerepitheelcellen en longkankerepitheelcellen als reactie op een remmer van STAT3-fosforylering, OPB-51602 [40].

In de apoptose-route werden de zes pro-apoptotische genen van CASP3, CASP7, CASP9, TNFRSF10A, TNFRSF10B en TNFSF10 opgereguleerd, terwijl de zes anti-apoptotische genen van AKT1, ALB, BCL2, BCL2L1, MCL1 en XIAP werden gedownreguleerd (Fig. 6b, Aanvullend bestand 1:Tabel S3), dat gecorreleerd was met dosisafhankelijke cytotoxiciteit in C3A-cellen (Fig. 2a). In DNA damage and repair check point, genes of the checkpoint kinases (CHEK1/2), the DNA excision repair genes (ERCC1/2/3), and the DNA ligase IV (LIG4) were upregulated but other excision repair genes (ERCC5/6, XRCC1/5), the checkpoint kinase (CDKN1A), and protein kinases (PRKDC) genes were downregulated (2- to 19-fold). These results suggested that the 40 nm PEG-AuNP-induced interference with cell cycle and DNA repair system may correlate with an induction of cell death in C3A cells (Fig. 2a, Additional file 1:Table S3). Genes encoding two different heat shock proteins (HSP) (A1A and A1B) were upregulated (10.2- to 14.2-fold) but HSP40 subfamily A, B, and C; HSP90 member 1; and HSP60 were downregulated (2- to 16-fold) (Additional file 1:Table S4).

In oxidative stress and antioxidant response, the 40 nm PEG-AuNP at LC₅₀ value induced antioxidants genes and suppressed pro-oxidants, which was associated with a decrease in ROS/RNS generation being antioxidant itself (Fig. 4b). In antioxidant genes, glutathione peroxidase (GPX) 1, GPX2, GPX4, PRDX1, PRDX2, PRDX6, superoxide dismutase (SOD) 1, and CAT were induced (3.8- to 18.1-fold). In pro-oxidant genes, TXNIP and PPP1R15B were suppressed (4.8- and 17-fold, respectively) (Fig. 6c, Additional file 1:Table S5). This is consistent with a previous study that AuNP displayed oxidative stress-induced cytotoxicity in HepG2 and human hepatocytes, irrespective of size [7, 19].

In phase I metabolism, CYP3A4 and ESD genes were extensively suppressed (7-fold and 12-fold, respectively). Especially, inhibitory effect of 40 nm PEG-AuNP on CYP3A4 expression was correlated with a decrease in CYP3A4 activity (Fig. 5). Recent studies reported that the 40 nm BPEI-AuNP inhibited gene expression of CYP1A2, CYP2C9, and CYP3A4 in human hepatocytes; ESD in HUVEC; and CYP1A1 in HPTC [7,8,9]. Epidemiology study demonstrated that CYP enzymes in liver tissue of HCC patient were substantially inhibited by the tumorigenic process at the molecular and the functional level [41].

Drug Uptake and Efflux Transporter Gene Expression Profiling

The development of multidrug resistance (MDR) by tumor cells is one of the main causes of cancer treatment failures [42, 43]. Integral membrane transporters-mediated decrease in drug uptake and increase in drug efflux including P-glycoprotein (P-gp) and breast cancer resistance protein (BCRP) is one of the major mechanisms of MDR.

Differential gene expression of drug efflux and uptake transporters in C3A cells exposed to 40 nm PEG-AuNP showed that a total of 14 genes of ABC transporters (↓12 and ↑2 genes) and a total of 21 genes of SLC transporters (↓21 and ↑0 genes) were substantially modulated at LC₅₀ value (Figs. 6d and 7, Additional file 1:Table S7). In drug efflux transporters of ABC family, genes of multidrug resistance-associated protein (MRP3/ABCC3), MRP4 (ABCC4), and cholesterol efflux regulated protein (CERP/ABCA1) in basolateral membrane were downregulated (7.2- to 10.4-fold). The genes encoding P-gp (ABCB1), MRP2 (ABCC2), BCRP (ABCG2), and sterolin 2 (ABCG8) in canalicular efflux transporters were also suppressed (8.6- to 13.8-fold). In contrast, multidrug resistance (MDR4/ABCB4) in canalicular membrane and mitochondria ABC transporter (MTABC3/ABCB6) in the outer mitochondrial membrane were highly upregulated (9.8-fold and 5.8-fold, respectively). In drug uptake transporters, genes of copper transporter protein (CTR1/SLC31A1) and to a lesser degree organic anion transporting (OAT7/SLC22A9) were also inhibited (18- fold and 15-fold, respectively). These results support a recent study that the 40 nm BPEI-AuNP downregulate MDR3 in human hepatocytes but upregulates MRP3 in HUVEC indicating surface charge- and cell type-dependent interaction between AuNP and efflux transporters [7, 8]. Epidemiology study exhibited that a high expression of BCRP and a low expression of OCT3 occurred in HCC tumor, which was closely associated with the tumor progression and its size [44]. A previous study exhibited that P-gp inhibitor, verapamil enhanced cytotoxicity of glutathione-AuNP conjugated with doxorubicin in feline fibrosarcoma cell lines by increasing intracellular drug concentration [45]. The current study emphasizes that the mechanisms-derived information on the 40 nm PEG-AuNP identified a separate but still complementary action on mitochondrial fatty acid β-oxidation, TCA cycle and respiratory chain, drug efflux and uptake transporters, as well as CYP3A4 activity in C3A cells (Fig. 7). To the end, this will highlight AuNP interaction with key biological processes and its underlying molecular mechanism in HCC, which may be further implicated in the development of more effective therapeutic target in HCC treatment.

A schematic representation of the basic mechanisms of action of 40 nm PEG-AuNP in HCC treatment. Green bars (an inhibition) and pink triangles (an induction) indicate the 40 nm PEG-AuNP-modified biological markers and pathways. Gene ontology analysis is listed in Additional file 1:Tables S2–S7

To validate gene expression analysis from RT ² array, the nine genes were selected for real-time PCR. In Additional file 1:Table S1, all nine genes were modulated at LC₅₀ of the 40 nm PEG-AuNP. These transcriptional changes were consistent with those in gene expression analysis with PCR arrays (Fig. 6, Additional file 1:Tables S2–S7).

Conclusions

We have presented that cationic BPEI-, anionic LA-, or neutral PEG-AuNP interaction with human plasma protein corona (PC) caused the changes in D _H , PDI, and z-potential of AuNP and further influenced cellular responses in C3A cells. All bare (no PC) 40 and 80 nm AuNP were cytotoxic to C3A cells besides the 80 nm LA-AuNP but PC completely ameliorated their cytotoxicities besides the 80 nm BPEI-AuNP. The 40 nm bare BPEI-AuNP showed the highest cellular uptake followed by the 40 nm PEG-AuNP and then the 40 nm LA-AuNP, whereas PC suppressed AuNP uptake besides the 80 nm PEG-AuNP. The 40 nm BPEI-AuNP caused biphasic responses of oxidative stress (pro- and antioxidant) in C3A cells, whereas the 40 nm PEG-AuNP was antioxidant. CYP3A4 activity was extensively suppressed by all bare AuNP, irrespective of size and surface charges, whereas PC substantially ameliorated its inhibitory effect on enzyme activity besides the 40 and 80 nm PEG-AuNP. Differentially expressed genes at LC₅₀ value of 40 nm PEG-AuNP were mainly involved in mitochondrial fatty acid β-oxidation and to a lesser degree hepatic efflux/uptake transporters. The 40 nm PEG-AuNP inhibited three main enzymes in β-oxidation (acyl-CoA dehydrogenase, enoyl-CoA hydratase, and ketoacyl-CoA thiolase), other enzymes in TCA cycle, and the mitochondrial respiratory chain for ATP production. The 40 nm PEG-AuNP increased the expression of pro-apoptotic genes and decreased anti-apoptotic genes at LC₅₀ value. A high level of antioxidants and a low level of pro-oxidants genes were observed in C3A cells exposed to 40 nm PEG-AuNP. In addition, genes of drug efflux and uptake transporters located in both basolateral and canalicular membrane were substantially modulated.

Afkortingen

ANOVA:

One-way analysis of variance

AuNP:

Gold nanoparticles bare:no PC

BPEI:

Branched polyethylenimine

CYP:

Cytochrome P450

D _H :

Hydrodynamic diameters

DLS:

Dynamische lichtverstrooiing

EDTA:

Ethylenediaminetetraacetic acid

EMEM:

Eagle’s minimum essential medium

HCC:

Human hepatocellular carcinoma

HPTC:

Human renal proximal tubular cells

HSD:

Tukey’s honest significant difference test

HUVEC:

Human umbilical vein cells

ICP-MS:

Inductively coupled plasma mass spectrometry

LA:

Anionic lipoic acid

LC₅₀ :

Median lethal concentration

MDR:

Multidrug resistance

NP:

Nanodeeltjes

PBS:

Phosphate-buffered saline

PC:

Human plasma protein corona

PDI:

Polydispersity index

PEG:

Neutral polyethylene glycol

RNAi:

RNA interference

RNS:

Reactive nitrogen species

ROS:

Reactieve zuurstofsoorten

SO:

Superoxide

TEM:

Transmissie-elektronenmicroscopie

TFF:

Tangential flow filtration